风湿佳抗炎镇痛及免疫抑制作用的研究(2)
2.3.4对小白鼠巨噬细胞吞噬功能的影响:取小白鼠60只,分组与给药均同脾淋巴细胞转化实验。末次灌胃后腹腔注射1%鸡红细胞悬液1ml/只。30min后颈椎脱臼处死,用腹腔渗出液涂片,甲醇固定,吉姆萨染片,镜下观察100个巨噬细胞,求出吞噬率和吞噬指数。
2.3.5对小白鼠血清溶血素的影响:与DTH实验共用一批小白鼠,即DTH测量结束后,摘眼球采血于离心管内,分离出血清备用,用生理盐水将血清倍比稀释,将不同血清分别置于血凝试验板上,每孔100μl,再加入0.5%SRBC100μl混匀,保持温度37℃温育3h,观察血球凝集程度。
2.3.6对抗体生成细胞功能的影响:与DTH共用一批小白鼠,即DTH测量结束后,摘眼球采血后,无菌条件下取脾,制成脾细胞悬液(方法同前),取正常5只豚鼠血清混合,按每5ml血清中加入SRBC1ml震荡30min,离心取上清液制成补体,冷冻保存备用,将表层培养基(1g琼脂糖加双蒸水100ml),加热溶解,放在45℃水浴中保温,与等量pH值7.2两倍浓度hanks液混合,分装小食管,每管0.5ml,再向管内加入10%SRBC50μl、脾细胞悬液20μl,迅速混匀倾倒于已刷琼脂糖薄层的玻片上,待凝固后将玻片扣放在片架上,37℃温育1~1.5h,然后加入SA缓冲液稀释的补体(1∶10)继续温育1~1.5h,计数溶血空斑数。
2.4急性毒性实验:取小白鼠40只,体重(25±2)g,随机分为4组,用风湿佳分别以下列剂量灌胃:6ml/kg,10mlg/kg,16mlg/kg和27ml/kg,后2剂量分2~3次在1d内灌完。灌胃后很快出现酒醉状态,2~3h后部分动物开始恢复,观察10d,各组动物死亡数分别为0,2,8,10只。
2.5统计方法:计量资料数据用±s表示,组间比较用t检验,计数资料用X2检验。
3结果
3.1抗炎作用3.1.1对抗新鲜鸡蛋清致大白鼠足跖肿胀的作用:实验结果表明,高浓度风湿佳药后30min足跖肿胀程度与生理盐水对照组比较有显著性差异(P<0.05),药后60,90,120,150min足跖肿胀程度与生理盐水对照组比较有非常显著性差异(P<0.01),高浓度风湿佳与地塞米松组比较无显著性差异(P<0.05)。
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