中药三棱炮制方法工艺优化的考察(2)

2.5 三棱醋炙工艺的考察参照文献［2］选用减压冷浸方法净制三棱药材，切片备用。考察醋炙温度、醋炙时间、浸润时间和用醋量4个因素，各设3个水平，建立正交实验表L9（34）（见表4）。考虑误差的影响，每次实验进行3次平行实验。炮制方法后按照优选后的方法提取（具体提取方法见供试品溶液的制备）。实验结果（见表5）显示炮制方法因素的主次为D>A>B>C，结合比位级最佳组合为A2B2C1D2.方差分析（见表6）显示因素A、B 为显著因素［F值>F0.05（2，18）， F0.05（2，18）=3.55］，而B、C对实验影响不显著［F值< F0.05（2，18）］，故将B、C列入误差项处理。考虑实验最终测得含量和饮片形性状特征，最终选择最佳工艺为D2A2B3C1，即用20﹪的用醋量浸润10 min于150℃下炒制15 min即得。

表4 三棱醋炙工艺实验因素和水平（略）

表5 三棱不同醋炙方案和实验结果（略）

表6 醋炙工艺方差分析（略）

*示显著性差异

2.6 三棱不同炮制方法品的制备及结果 参考文献收载的三棱其它炮制方法工艺［2］，分别测定含量，并与本实验中醋炙优化工艺进行横向比较，考察各方法的优劣（结果见表7）。由结果可知优化后的醋炙方法在黄酮含量上明显高于其它方法，说明优化后的醋炙工艺确实提高了炮制方法饮片的质量。

表7 三棱不同炮制方法品总黄酮含量比较（略）

3 方法学考察

3.1 精密度实验 精密量取浓度为0.112 mg/ml的对照品溶液3 ml定容，重复测定5次，测定芦丁含量，计算RSD.RSD为0.62%.

3.2 重现性实验 精密量取浓度为0.112 mg/ml的对照品溶液3 ml定容，重复测定5次，测定芦丁含量，计算RSD.RSD为0.53%.

3.3 稳定性实验 精密量取浓度为0.112 mg/ml的对照品溶液3 ml定容，每隔10 min测定芦丁含量1次，计算RSD.RSD为1.23%.

3.4 加样回收率实验 采用加样回收法，取已知含量的三棱粉末5份，精密称定5 g，置于100 ml的容量瓶中，分别精密吸取0.112 mg/ml的芦丁对照品溶液2 ml，置于上述100 ml的容量瓶中，按供试品溶液制备及测定法操作，计算结果。芦丁的加样回收率为103.57%，RSD为1.31%.

4 讨论

三棱目前有效成分不明确，可能的有效部位有黄酮类、甘露醇、皂苷、挥发油［3］。由于黄酮多具有活血化淤的作用，故本实验选用三棱总黄酮作为可能的有效部位，并以总黄酮为主要指标对其炮制方法及制法规范进行考察。

优化后的醋炙法总黄酮含量明显的比其它方法高，说明醋炙法比其它方法好，这和目前三棱主流炮制方法工艺相吻合。此外，本实验考察三棱的最佳醋炙工艺为20﹪的用醋量浸润10 min在150℃下炒制15 min（医学网搜集整理），可以为三棱最佳醋炙工艺提供参考。

【参考文献】

［1］ 国家药典委员会。中国药典［S］。北京：化学工业出版社，2005：11.

［2］ 毛淑杰，沈 鸿，解静萍。三棱不同炮制方法品黄酮成分含量测定［J］。中国中药杂志，1999，24（1）：29.1.

［3］ 张淑运。三棱化学成分研究［J］。中国中药杂志，1995，20（8）：486.