各类甙的性质与定性反应总结(2)

5）定量方法： 一般有重量法、容量法、萤光法、比色法等。以比色法应用最广泛。主要原理是利用羟基蒽醌衍生物与碱液生成红色进行比色。且因游离的羟基蒽醌类一般生物活性较其甙类小、故要测定结合蒽醌的含量。兹简介比色法如下：

a）标准曲线的制备： 精密称取50mg左右的1，8一二羟基蒽醌，于250ml容量并中用乙醚溶解并稀释至刻度。精密量取上述标准液0.50、1.00、2.00、3.00、4.00、5.00m1，分别放人25ml容量瓶中，在水溶上蒸去乙醚，加5%氢氧化钠及2%氢氧化铵混合碱液至刻度，摇匀，30分钟后比色，以试剂为空白对照，绘出光密度——浓度的曲线。

b）测定方法：

（1）游离蒽醌的测定： 药材粉末（40目）0.1～29，在索氏提取器中以氯仿提取至无色，氯仿液以5%氢氧化钠及2%氢氧化铵混合碱液萃取至无色。碱液用少量氯仿洗涤，过滤，沸水浴中加热4分钟，冷至室温，调整至一定体积，30分钟后同上法比色，由标准曲线计算含量。

（2）结合蒽醌的测定： 药材粉末（40目）0.1～1g于三角烧瓶中加30m1 5N硫酸液回流水解2小时，稍冷后加30ml氯仿继续回流1小时，用吸管吸出氯仿液，加入20ml氯仿继续回流1小时，吸出氯仿液后再加10ml氯仿，重复操作至提取液无色。合并氯仿液，用少量蒸馏水洗涤，用同上混合碱液同法进行比色测定，测得之总蒽醌含量减去游离蒽醌含量，即得结合蒽醌含量。

5.黄酮类及黄酮甙（Flavonoid g1ycosdes）

又称黄碱素类，是广泛存在于植物界的一类天然色素。在许多中草药内是有效成分，具有C6-C3-C6的基本碳架。从这个基本碳架可以衍生出许多不同的结构。目前已知的约有18种类型，其中主要的有下列几种，在柏科、银杏科、杉科等裸子植物中尚有双黄酮（Biflayones）存在。大多数黄酮类化合物与葡萄糖或鼠李糖结合成甙，部分为游离状态或与鞣质结合存在。

（1）通性： 黄酮类大多为黄色结晶物，也有的是无定形粉末如白花色甙元和其甙类。异黄酮几无色或浅黄色。双氢黄酮与双氢黄酮醇均无色。黄酮甙一般易溶于热水、甲醇、乙醇、吡啶、乙酸乙酯与稀碱液，难溶于冷水及苯、乙醚、氯仿中。游离的黄酮类一般难溶于，较易溶于有机溶剂（在乙酸乙酯中溶解度较大）与稀碱液。一些黄酮类在紫外光下可显萤光，如以氨蒸汽或碳酸钠水溶液处理后萤光更明显。多数黄酮类可与镁盐、铝盐、铅盐等反应生成颜色较深的络合物。

（2）分布与作用： 黄酮类及黄酮甙在植物界分布广泛，许多中草药均含本类成分如槐花米、黄芩、陈皮、葛根、野菊花、水飞蓟、银杏叶等。以豆科、芸香科、菊科、唇形科的植物中较多。一般具降压、抗菌以及调节血营渗透压的作用，目前还发现有抑制肿瘤细胞与防护紫外线损伤的作用。

（3）定性反应

①药材粉末少量置试管中，加95%乙醇数ml，温热浸出，过滤，滤液加镁粉与数滴浓盐酸，溶液变橙或红色。这是由于黄酮类被还原生成花色甙元与其二聚物而致。分子中羟基或申氧基数目多时，色较深，C3位上无羟基的黄酮类反应不明显。

②药材粉末的乙醇溶液加1%三氯化铝乙醇溶液，凡3位或5位有羟基的黄酮会因与Al产生络合物而显鲜黄色。

（4）定量方法： 一般有重量法、萤光法、比色法等，通常多用比色法。主要原理是根据黄酮类成分结构中有碱性氧原子，一般又多有酚羟基，可以与许多试剂产生颜色而制定。下面简介比色法。

①标准曲线的制备： 精密称取标准芸香甙一定量，以乙醇溶解并稀释至每ml约含60μg，精密量取0.5～5.00 ml不同量的此溶液，分别用乙醇稀释至5.00 m1，准确加入3ml 0.1M三氯化铝溶液及5mI1M醋酸钾溶液，放置40分钟，在分光光度计415nm测定光密度，绘制光密度一浓度标准曲线。

②测定方法： 精密称取样品粉末（60目）0.5～1.09于100ml锥形瓶中，精密加入一定量稀醇，将锥形瓶与内容物共称重（准确到0.1g），水浴回流一定时间，冷后再称重，补充溶剂至原重，过滤，取一定量滤液稀释到适当浓度，取此液一定量，准确加入3ml 0.1M氯化铝溶液及5mI 1M醋酸钾溶液，另补充蒸馏水使总量为13m1， 40分钟后同上比色，以同一滤液同样量加水至13 ml为空白对照，以标准曲线计算含量。

6.香豆精及香豆精甙（Coumarin g1ycosides）