除去杂抗体的两种方法

除去杂抗体的两种方法：

1.亲和层析法

将交叉杂抗原交联到琼脂糖珠4B上（国家医学考试网搜集整理），如除去抗白蛋白抗体，则交联上白蛋白或不含甲胎蛋白的血清，装柱后，将预吸收的抗体通过亲和层析柱，杂抗体吸附在柱上，流出液则是单价特异性抗体。

2.吸附剂方法

用不含特异性抗原的抗原液，即不含用于免疫动物抗原的其他杂抗原液，如血清、组织液或已知的某种杂抗原，用双功能试剂将其交联，做成固相吸附剂。如用不含甲胎蛋白的血清，稀释1倍后，加入0.25%的戊二醛或丙酮醛，放冰箱一夜后，该血清成为胶冻状，用力打碎（或用组织粉碎器），用缓冲液多次洗涤后，则成为颗粒状的凝胶吸附剂。用这种吸附剂直接加到抗血清中（约1/10），抗原则与杂抗体结合，上清液则为无杂抗体的单价特异性抗体。有时因杂抗体太多，必须处理吸收两次才能完全去除。吸附过的凝胶，用3mol/L硫氰酸钾（或钠）洗涤，洗脱掉杂抗体，可再继续使用。

有时杂抗原较少，其他蛋白也少，加入戊二醛后不形成胶冻状，此时可加入无关蛋白进行交联，如牛血清蛋白、兔血清、马血清、卵白蛋白等。加入量以达到含总蛋白的2%～3%为宜。