中性粒细胞吞噬和杀菌功能的检测
http://www.ykbg.net/ 来源:医考必过网 2016-11-11 18:17
检测原则是将受检细胞悬液按一定比例混和,继加活的白色念珠菌悬液,保温生,加美蓝溶液作活体染色,取样涂片
检测原则是将受检细胞悬液按一定比例混和,继加活的白色念珠菌悬液,保温生,加美蓝溶液作活体染色,取样涂片镜检。如胞内白色念珠菌呈蓝色,表示该菌已被杀死,共计100200个细胞,分别求其吞噬率和杀菌率。
溶细胞法更能直接反映细胞杀菌的情况,将受检的细胞悬液与一定量已经新鲜人血清调理过的大肠杆菌或金黄色葡萄球菌悬液混合后,置37℃,每隔一定时间取定量培养物,稀释后接种固体平板培养基,37℃培养18h后,计算菌落数,据以计算中性粒细胞的杀菌能力。
正常情况下,对大肠杆菌的杀菌率约为90%,对金黄色葡萄球菌的杀菌率约为85%.
在临床常用的硝基四氮唑蓝(NBT)还原试验,本法用以检测中性粒细胞的胞内杀菌能力,由于中性粒细胞在杀菌过程中能量消耗剧增,耗氧量亦随之相应增加,磷酸己糖旁路代谢活力增强,葡萄糖6-磷酸氧化脱氢,此时加入NBT可接受所脱的氢,使原先呈淡黄包的NBT还原成点状或块状甲朊颗粒并沉积在胞浆内。
近此年来还采用了新颖的化学发光法,中性粒细胞在吞噬经调理的金黄色葡萄球菌过程中,伴有化学发光的产生,故可用化学发光仪测定中性粒细胞的吞噬功能及其代谢活性。实验证明全血化学发光试验可同时获得两种信息,即中性粒细胞的吞噬功能、代谢活性及受检血清的调理功能。(医考网搜集整理)由于中性粒细胞的氧代谢活性与对细胞的吞噬率密切相关,杀菌能力与发光强度相平行,因此化学发光法可检测细胞杀菌功能。因此吞噬细胞化学发光测定法可用以研究中性粒细胞的吞噬功能,代谢活性和血清调理功能,它可在生理温度和中性环境下测定,能较好地反映生理条件下吞噬细胞的功能,具有准确灵敏、样品用量少,简便快速等优点。其敏感性高于NBT还原试验。
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