流感嗜血杆菌知识汇总-检验士资料

流感嗜血杆菌知识汇总-检验士资料：

生物学性状：

流感嗜血杆菌，简称流感杆菌。

（1）形态与染色：急性感染标本上，如脑脊液中多为短小球杆菌（国家医学考试网搜集整理），恢复期病灶或长期人工传代培养后可呈球杆状、长秆状、丝状等多形态性。

毒力株（黏液型菌株）在营养丰富的培养基上，6-8小时有明显荚膜，在陈旧培养物中荚膜消失。

无鞭毛，无芽孢。革兰染色阴性，但着色较浅。用苯酚复红或亚甲兰单染色，呈现两端浓染现象。

（2）培养特性：需氧菌。最适生长温度为35℃，最适pH为7.6-7.8.初次分离培养最好在5%-10%CO2环境中，以促进其生长。

在普通培养基中需加入X和V因子才能生长。血液中的V因子通常处于抑制状态，经80-90℃加热10分钟，使V因子释放，故流感嗜血杆菌在加热血平板上生长良好，培养18-24小时后生长直径为0.5-0.8mm、圆形、光滑、湿润、边缘整齐，呈露滴状的小菌落。48小时后可形成直径1.0-1.5mm灰白色较大的菌落。有荚膜菌株的菌落呈轻度粘稠。

当流感嗜血杆菌与金黄色葡萄球菌在血琼脂平板上共同培养时，金黄色葡萄球菌能合成较多V因子，可促使流感嗜血杆菌生长。故在金黄色葡萄球菌落周围生长的流感嗜血杆菌菌落较大，离金黄色葡萄球菌落越远的菌落越小，此称为卫星现象。有助于流感嗜血杆菌菌的鉴定。

在液体培养基中，有荚膜的菌株呈均匀浑浊生长，无荚膜的R型菌株则为颗粒状沉淀生长。

（3）生化反应：流感嗜血杆菌对糖发酵不稳定。一般分解葡萄糖只产酸，不分解乳糖或甘露醇，对麦芽糖、蔗糖或糊精的发酵不稳定。所有菌株还原硝酸盐。有荚膜菌株产生吲哚。典型菌株不溶血。产生自溶酶，可被胆汁溶解。根据流感嗜血杆菌产生吲哚，尿酸酶及鸟氨酸脱羧酶反应，将其分为8个生化型。

致病性：

主要通过呼吸道感染，引起原发性或继发性感染。原发性感染多由b型荚膜强毒株引起，为急性化脓感染，如脑膜炎、鼻咽炎、咽喉会厌炎、化脓性关节炎、心包炎及败血症。继发感染主要在流感、麻疹、百日咳、肺结核等感染后发生，多为无荚膜菌株引起。如慢性支气管炎、中耳炎、鼻窦炎、肺炎等。

致病物质为内毒素、荚膜、菌毛和酶类。

微生物检验：

（1）标本采集：可采集痰液、脑脊液、鼻咽分泌物及脓液等。

（2）检验方法：

1）直接镜检：痰液、脓液等标本可直接涂片，脑脊液可取离心沉淀物涂片，革兰染色镜检。如查到革兰阴性小杆菌或多形态杆菌，结合临床，可做初步诊断。

2）分离培养与鉴定：将血液、脑脊液标本先增菌培养后，再转种巧克力琼脂平板或选择性巧克力琼脂平板，经37℃培养24-48小时。根据菌落形态、涂片染色、卫星现象，X、V因子需求与否，定种，再作生化试验和荚膜肿胀试验分型。

3）如何提高流感嗜血杆菌的阳性率：

①初次培养应在5%-10%CO2环境；

②生长需要X、V因子，故在培养基中应添加此因子；

③应用选择性培养基，如巧克力琼脂中加一定量抗生素，1ml培养基中含万古霉素50μg，杆菌肽300μg，克林可霉素1μg，嗜血杆菌分离率可达96.7%.