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交叉配合试验具体步骤-检验师辅导

http://www.ykbg.net/ 来源:医考必过网 2016-01-27 19:02
交叉配合试验具体步骤-检验师辅导:传统的交叉配合(crossmatching)试验是检测受者体内是否存在抗供者的特异性抗体

交叉配合试验具体步骤-检验师辅导:

传统的交叉配合(crossmatching)试验是检测受者体内是否存在抗供者的特异性抗体,现在可同时检测受者对供者LD抗原的相容程度。不管是否已经进行过各种HLA分型试验,交叉配合试验对选择移植物都有一定的参考价值。

1.微量细胞毒试验:

用供者的淋巴细胞作靶细胞(国家医学考试网搜集整理),与受者的血清进行CDC;出现阳性反应说明受者体内含有抗供者的特异性抗体,移植后很有可能发生超急排斥反应。若要明确受者的抗体是抗Ⅰ类抗原还是抗Ⅱ类抗原,可以将供者的淋巴细胞进一步分离出较纯的T细胞和B细胞分别进行检测;若要排除患者自身抗体的影响,可以用患者自己的细胞与自已的血清进行试验作为对照。

交叉配合是移值前必须做的一个检验项目;对一些曾经接触过移植抗原的受者,例如多次接受输血者、经产妇、有不成功移植史或接受过血清透析治疗者,尤其要进行审慎的检验。

2.流式细胞仪检测:

将供者淋巴细胞与受者血清共育后,用荧光标记的抗人Ig对结合有抗体的细胞染色,在流式细胞仪上进行荧光标记测定。该法比微量细胞毒法的灵敏度高100倍,有条件的单位可以优先考虑使用。

3.混合淋巴细胞培养:

将供者与受者的淋巴细胞做双向混合培养,或者灭活供者的淋巴细胞做向混合培养,细胞反应的程度与供-受者相容的程度呈负相关。

4.细胞介导的淋巴细胞毒试验检测:

受者对移植物可能发生的细胞介导的淋巴细胞毒作用(cell-mediatedlymphocytotoxicity,CML)。将受者淋巴细胞与灭活的供者淋巴细胞做常规单向MLC,收获致敏的受者淋巴细胞后,再与51Cr标记的、PHA刺激的供者淋巴细胞做CML试验;51Cr释放的程度与供-受者相容程度呈负相关。

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