张建新邱世翠李波清刘金荣彭启海

提要目的：探讨中药黄芪增强机体免疫功能。方法：用100%黄芪水浸出液定期给小鼠灌胃，然后测定对小鼠淋巴细胞增殖和IL-2产生。结果：用药组小鼠的以上两项免疫学指标均有明显改变，与对照组相比差异有非常显著性（P＜0.001），未见有副作用。结论：口服黄芪可明显增强机体的免疫功能。

关键词黄芪；免疫功能；小鼠

分类号：R285.5文献标识码：A文章编号：1008-0805（2000）06-0488-01

EffectofAstragalusmembranaceus（AM）onImmuneFunctionofMice

ZHANGJian-xin，QIUShi-cui，LIBo-qing

（BinzhouMedicalCollege，Binzhou，ShandongProvince，256603，China）

LIUJin-rong

（ThePeople'sHospital

ofLijinCounty，Shandong257400，China）

PENGQi-hai

（LizeHospitalofBinzhou，Shandong256656，China）

AbstractObjective：ToresearchtheimmunityreinforcementeffectofAM.Methods：Filledthestomachesofmicewith100%waterextractofAMregularlyandtestedlymphocyteproliferationandinterleukin-2（IL-2）production.Results：Comparedwithcontrolgroup，thelymphocyteproliferationandIL-2productionincreasedsignificantlyinAMgroup（P＜0.001）andnosideeffectappeared.Conclusion：TheseresultsindicatedthattakingAMorallycanenhanceimmunefunctionobviously.

KeywordsAstragalusmembranaceus（AM）；Immunefunction；Mouse；

黄芪是临床上常用的中药［1］。具有补气、固表、利尿、生肌的作用，亦常用作肿瘤及免疫功能下降的辅助治疗用药。通过增加抗体产生［2］，促进IL-2、IL-3等细胞因子的分泌，明显提高机体的细胞免疫和体液免疫功能。为了进一步明确它的免疫调节功能，笔者进行了有关方面的研究。

1材料与方法

1.1试剂和仪器：黄芪（购于滨州医学院附属医院中药房）取50g加水500ml文火煎煮2h，去渣浓缩为50ml备用。美国产MultisKan全自动酶标仪，CO2培养箱由美国Forma公司生产；美国产（IE.USA）冷冻离心机：超净工作台由苏州净化设备厂生产。ConA为美国Sigma产品；MTT为FLUKA公司产品；二甲基亚矾（DMSO）苏州化工研究所产：RPMI-1640GIBCO公司产品。

1.2动物分组与给药：Ba1b/C小鼠，体重18～22g雌雄兼有，购于北京医科大学实验动物中心。将动物随机分为两组，每组8只，Ⅰ组为生理盐水对照组，Ⅱ组为药物实验组。Ⅰ组用生理盐水灌胃，1次/d，0.5ml/（次*只）；Ⅱ组用黄芪液灌胃，1次/d，0.5ml（次*只）；共灌胃10次。

1.3检测指标及方法

1.3.1淋巴细胞增殖反应［3］：无菌制备小鼠脾细胞悬液，用RPMI-1640不完全营养液洗涤2次，1000r/min离心10min，然后用完全营养液配成5×106/ml，取100μl加入96孔细胞培养板内（每孔含5×105/ml个细胞），加入终浓度为5μg/ml的ConA，37℃，5%CO2培养箱中培养48h后，每孔加入10μlMTT溶液（5mg/ml），再继续培养至12h，然后加入DMSO100μl，充分振荡后静止20min，用检测波长560nm全自动酶标仪进行比色分析。

1.3.2IL-2的诱生：取上述已制备的脾细胞悬液5×106/ml，放培养瓶中37℃，5%CO2培养箱中培养40h，离心收集上清液，-20℃冰箱保存备用。

1.3.3制备活化的脾淋巴细胞［5］：按上法取正常Balb/C小鼠无菌取脾脏，制成5×106/ml细胞悬液，加入ConA使其终浓度为5μg/ml，置37℃，5%CO2培养箱中培养48h，收集细胞，离心洗2次，用完全RPMI-1640配成5×105/ml细胞悬液，作为测IL-2的反应细胞。

1.3.4IL-2活性检测：取-20℃保存的IL-2上清，并做1/2和1/4的稀释，在96孔平底培养板中，每孔加入IL-2上清原液或不同稀释度的IL-2上清100μl，以及上述反应细胞100μl；阴性对照不加IL-2上清，加100μl1640培养液，各没4复孔。于37℃，5%CO2培养箱培养48h，每孔加MTT（5mg/ml）10μl，继续培养4h，吸弃100μl上清，加入酸化异丙醇100μl（0.04mol/L、HCl-异丙醇），充分振荡后静止20min，用检测波长560nmHCl全自动酶标仪进行比色分析。

1.4结果处理：实验结果采用组间均数差异性t检验的方法进行统计分析。

2结果

2.1黄芪对小鼠脾淋巴细胞增殖反应的影响：表1结果表明，用药组对脾脏T细胞增殖反应明显，组间相比有非常显著性差异（P＜0.001）。

2.2黄芪对小鼠IL-2产生的影响：表2结果显示，用药组IL-2的水平明显增强，组间相比有非常显著性差异（P＜0.001）。

表1黄芪对小鼠脾淋巴细胞增殖反应的影响（±s）

组别nA560P

对照组80.116±0.004

药物组80.402±0.021＜0.001

表2黄芪对小鼠IL—2产生的影响（±s）

组别nA560P

对照组80.140±0.005

药物组80.313±0.014＜0.001

3讨论