螺旋藻多糖含量测定

朱 英 罗永明 严喜鸾 曹 岚

提要 用苯酚-硫酸法进行螺旋藻多糖的含量测定，方法简便，结果准确，平均回收率为99.71%，变异系数1.479%.关键词 螺旋藻； 多糖； 含量测定

The Deterimination of Polysaccharides in Spitulina Maxima

Zhu Ying， Luo Yongming， Yan Xiluan， et al Jiangxi College of TCM， Nanchang 330006

Abstract The deterimination of polysaccharides in spitulina maxima was made by a simple and precious method of phenol-sulphuric acid. The average rate of recovery is 99.71% and variation coefficient is 1.479%. Key words Spitulina maxima， Polysaccharides， Deterimination

螺旋藻属（Spitulina Turpin）属于原核植物的蓝藻门、蓝藻纲、段殖体目颤藻科，含有极丰富营养成分和有抗辐射、抗肿瘤及调节免疫功能的耐卤藻类。近几年的研究表明，螺旋藻中抗肿瘤和免疫调节作用的生理活性物质是多糖［1］。为此，我们采用苯酚—硫酸法测定了其多糖的含量。

1 仪器和药品721型分光光度计（上海），5%苯酚液（取苯酚100 g，加铝片0.1 g与碳酸氢钠0.05 g，蒸馏，收集182℃馏分，称取10 g，加水190 g，置棕色瓶中冷藏备用），螺旋藻干粉（由南昌外贸博源公司提供，品种为极大螺旋藻Spirulina maxima ）。

2 实验方法［2］2.1 多糖的提取：称取螺旋藻干粉100 g，用工业乙醇水浴回流提取2次，过滤，残渣置搪瓷盘水浴挥尽乙醇，用8倍、6倍、4倍量沸水分别煮1 h、40 min、30 min，合并3次滤液，水浴浓缩至适量，放冷后搅拌下加3倍量乙醇使沉淀析出，置冰箱4 h，离心，沉淀加蒸馏水溶解，再加乙醇至含醇量为80%，静置一夜，将析出物抽干，依次用乙醇、丙酮、乙醚抽洗多次，沉淀物80℃烘干，即得淡绿色粉末状螺旋藻多糖粗提物（医考网搜集整理）。

2.2 标准曲线：精密称取105℃干燥至恒重的葡萄糖 49.7 mg，置100 ml容量瓶中，加蒸馏水溶解，稀释至刻度，摇匀。制成标准溶液（0.49 mg/ml）。精密吸取标准液1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0 ml置50 ml容量瓶中，加水至刻度，摇匀。精密吸取上述各种浓度溶液2.0 ml，另精密吸取蒸馏水2.0 ml作空白对照，置具塞试管中，加5%苯酚溶液1.0 ml，浓硫酸5.0 ml摇匀，于沸水浴中加热15 min，冷却，于490 nm波长测定吸收度值。结果表明在0.00994～0.05964 μg浓度范围内呈良好线性关系。求得回归方程为 A=0.0457+0.0105 X， γ=0.9996， n=6. 2.3 回收率实验：按标准曲线项下的制备方法操作，以回归方程计算糖量的回收率，结果见表1，得平均回收率99.71%， n=6，CV=1.479%. 2.4 稳定性实验：取标准品及样品分别按分析方法操作，1次/10 min，连续40 min.结果表明吸收度变化很小，不影响测定。

表1 葡萄糖回收率实验结果

项 目 编 号 S CV（%）

1 2 3 4 5 6加入量（mg） 9.94 19.88 29.82 39.76 49.70 59.64 34.79 18.596 53.45 A 值 0.147 0.253 0.360 0.462 0.574 0.662 0.41 0.195 47.47回收量（μg） 9.68 19.81 30.04 39.79 50.50 58.91 34.79 18.607 53.48回收率（%） 97.43 99.65 100.74 100.07 101.61 98.78 99.71 1.474 1.479

2.5 样品含量测定：精密称取105℃干燥至恒重的螺旋藻多糖100.2 mg，置100 ml容量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀。精密吸取该溶液2.0 ml和5.0 ml置50 ml容量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，再精密吸取上述两种浓度溶液2.0 ml，按标准曲线项下，置具塞试管中操作，以蒸馏水为空白对照，测定吸收度。结果见表2.

表2 样品测定结果

样品量（μg） A值 检出量（μg） 含量（%）

40.08 0.150 0.993 2.5 100.2 0.330 2.707 2.7

3 讨论与小结配制好的5%苯酚溶液应冷藏避光保存，否则用苯酚—浓硫酸作空白对照时，颜色变深，影响结果。

作者基本解释：朱 英，女，1949年生，实验师作者单位：朱 英 罗永明 严喜鸾 曹 岚江西中医学院，南昌 330006

参考文献1 曹和平。螺旋藻多糖的研究。药学学报。1995，30（11）∶858 2 唐晓玲，蒋桂平，高培源，等。绞股蓝粘多糖的提取与初步分析。中成药。1995，11（7）∶7