谈牡丹皮中丹皮酚含量的动态变化
提要 利用反相高效液相色谱(RP-HPLC)法对不同采收期牡丹皮中丹皮酚含量进行了分析。结果表明,其丹皮酚的含量以开花期最高,随后逐渐减少,7月份后开始又逐渐回升,9月份出现一个高峰后又逐渐下降,丹皮酚含量在九十月份的含量较高,与《中国药典》1995年版规定秋季采挖是一致的。
关键词 牡丹皮; 丹皮酚; 反相HPLC; 采收期中图分类号:R284.2 文献标识码:A 文章编号:1008-0805(2000)03-0197-01
牡丹皮为毛茛科植物牡丹Paeonia suffruticosa Andr.的干燥根皮。《中国药典》1995年版规定秋季采挖根部,除去细根,剥取根皮,晒干。牡丹皮具有清热凉血、活血祛瘀之功效,其主要有效成分为丹皮酚。不同的采收期直接影响药材品质、产量、及资源的合理保护与开发利用。为此笔者以牡丹皮为样品,采用反相高效液相法测定不同采收期牡丹皮中丹皮酚的含量(医学网搜集整理)。
1 材料与仪器
1.1 材料:样品采于佛山职工医学院药用植物园,定点于同一棵植物,每月中旬采集1次,分别采集后晒干,粉碎成细粉,装于棕色玻璃瓶中备用,样品经鉴定为Paeonin suffruticosa Andr.的干燥根皮。丹皮酚对照品,中国药品生物制品检定所购买。
1.2 仪器与试药:高效液相色谱仪:Waters486检测器,Waters501泵,Waters U6k进样阀,810液相色谱工作站。甲醇为色谱用试剂;其它试剂均为分析纯。
1.3 色谱条件【1】色谱柱为十烷基硅烷键合硅胶Sherisob C18 5u,ID4.6×150 mm;流动相为甲醇-0.5%磷酸(60:40),检测波长274 nm;柱温为室温;流速1.0 ml/min.此条件下丹皮酚与其它组分均能达到基线分离。
2 方法与结果
2.1 对照品溶液的制备:取丹皮酚对照品2 mg,置100 ml的量瓶中,加甲醇稀释到刻度,摇匀,作为对照品溶液。
2.2 线性关系的考察:精密吸取对照品溶液5,10,15,20,25 μl按上述色谱条件测定峰面积,以峰面积积分值为横坐标,丹皮酚量为纵坐标绘制标准曲线,计算回归方程: Y=24 645+3 439 847 X,γ=0.999 8表明丹皮酚在0.10-0.50 μg范围内具有良好的线性关系。
2.3 精密度试验:精密吸取上述对照品溶液10 μl,重复进样5次,丹皮酚峰面积积分值的 RSD为0.06%. 2.4 重现性试验:取同一批样品,按含量测定项下测定样品溶液丹皮酚的含量。结果:2.575%,2.526%,2.568%,平均2.556%, RSD为2.43%. 2.5 回收率试验:采用加样回收法,取已知含量的样品分别加入丹皮酚对照品,按含量测定项下测定样品中丹皮酚的含量,计算回收率,结果平均回收率为98.85%, n=5, RSD=1.2%.本法具有较好的回收率。
2.6 样品的测定:取本品0.5 g,置100 ml的量瓶中,加入甲醇,超声波处理30 min,稀释至刻度,作为供试品溶液。分别吸取对照品溶液与供试品溶液各10 μl按上述的色谱条件测定,计算丹皮酚的含量,测定结果见表1.
表1 牡丹皮不同收期丹皮酚的含量测定结果(%)
采收日期 丹皮酚含量 平均含量 RSD 1 2 3 01-15 1.428 1.438 1.444 1.437 1.18 02-15 1.665 1.690 1.675 1.677 1.61 03-13 1.852 1.890 1.875 1.872 2.19 04-15 2.012 2.035 2.041 2.029 2.67 05-12 2.465 2.471 2.458 2.465 0.53 06-15 2.605 2.616 2.620 2.614 0.65 07-16 2.050 2.068 2.048 2.055 1.22 08-15 2.100 2.118 2.112 2.110 1.00 09-14 2.534 2.535 2.558 2.542 1.22 10-18 2.362 2.382 2.376 2.373 0.97 11-15 1.766 1.795 1.783 1.781 2.30 12-15 1.422 1.409 1.418 1.416 1.62
3 讨论3.1 因不同株植物同一采收期的含量有所差异,实验采用同一株牡丹采样,以减少实验误差。
3.2 实验结果显示,不同采收期牡丹皮中丹皮酚的含量以开花期最高,随后逐渐减少,7月份后开始又逐渐回升,9月份出现一个高峰后又逐渐下降。
3.3 实验结果显示,牡丹皮中丹皮酚含量在九十月份的含量较高,与《中国药典》1995年版规定秋季采挖是一致的。
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