三叶香茶菜种子发芽特性研究
【摘要】目的探讨三叶香茶菜种子的发芽特性。方法在不同温度、光照、pH值、水势、播深、发芽床、盐处理、贮藏方式下考察三叶香茶菜种子发芽特性。结果三叶香茶菜种子在20~30℃条件下萌发率较高,其中在25℃下,萌发率达90.0%.种子的pH值适应范围较小,在pH值为4~6时,萌发率较高,为79.8%~82.3%.最适萌发水势为-0.2MPa,萌发率达90.5%,而最适播深为0~2cm,出苗率达84.3%.在不同的发芽床中,纸上(TP)处理的发芽率最高,为91.3%.光照和赤霉素处理有利于种子的萌发;在冰箱和干燥器中保存,可以较长时间保持种子的活力。结论三叶香茶菜种子适应性相对较低,但萌发率高,合适的贮藏方式可保持较长时间。
【关键词】三叶香茶菜;种子;发芽特性
对中草药生物学特性的认识是实现中药材规范化种植研究的重要内容之一,也是近年来研究的热点。因此,对各种中草药种子萌发特性的研究不断受到重视。
三叶香茶菜为唇形科植物牛尾菜Rabdosiaternifolia(D.Don)Hara,又名三姐妹、细叶香茶菜、牛尾草、伤寒头。药用全草,味微苦,性凉。具有清热解毒、退黄利湿、消肿、化痰止咳的作用[1,2]。主要分布在广西河池、百色、南宁、玉林、梧州等地区,是广西特色中药材之一[3]。
三叶香茶菜对治疗乙肝有着明显的疗效,是复方三叶香茶菜片中的君药[4]。目前,随着复方三叶香茶菜片等中成药产品的成功开发,对药材的需求量大增,野生资源已不能满足市场需求。探讨三叶香茶菜野生变家种的途径势在必行,因此,从2004年起,笔者对三叶香茶菜种子发芽条件进行了初步研究,为田间大批量家种提供参考。
1材料与仪器
本实验所用三叶香茶菜种子均为2005年采于广西南宁市郊的向阳山坡或荒地,采后放入信封,室温下自然干燥、保存。发芽箱,LRH-400-G光照培养箱、LRH-250-G光照培养箱;发芽器皿,直径为9cm的培养皿及铝盒(10cm×20cm);发芽基质,发芽纸(市售,种子发芽专用,pH6.0~7.5),砂子(pH6.0~7.5,直径0.05~0.8mm,洗净后160℃高温消毒2h,使用时用无菌水拌成湿砂)。25mmol/L的2-磺基乙酸(MES),聚乙二醇,50%硫酸,50%盐酸,0.05%赤霉素,0.2%硝酸钾,0.2%氯化钠。
2方法
本试验每处理4次重复,每重复种子为100粒,以根长0.3cm作为发芽标准,计算萌发率。除温度影响试验外,其余试验的种子均置于25℃的光照培养箱中;除光照影响试验外,其余试验的种子均以光照12h处理,光照强度为2000Lx.
2.1温度影响
将三叶香茶菜种子置于双层滤纸铺垫的直径为9cm的培养皿中,加4.5ml去离子水。培养皿用封口膜封口以防止水分蒸发。发芽温度分别设5,10,15,20,25,30,35,40,45℃等恒温处理。最长培养时间为30d.
2.2光照影响
在置床后的培养皿中加去离子水后,分为2组处理,1组处理在加液后迅速放于密闭的铝盒中,并将铝盒装于黑袋中。每铝盒中装4个培养皿,分别于第7天和第14天开启观测,计算萌发率;另1组给予连续24h光照,光照强度为2000Lx左右,于第10天统计萌发率。
2.3pH的影响
将三叶香茶菜种子置于pH为2,4,6,8,10的缓冲液中,以去离子水为对照。缓冲液用25mmol·L-1的2-磺基乙酸(MES)配制,用HCl或NaOH调至设定的pH值。第10天统计萌芽率。
2.4水势的影响
用分子量为4000的PEG(聚乙二醇)配制成水势0,-0.2,-0.4,-0.6,-0.8,-1.0,-1.2和-1.5Mpa溶液,于第7天统计不同水势对三叶香茶菜种子的萌发状况的影响。
2.5播深的影响
用直径为7cm,深度为10cm的黑色培养杯,将种子依据0~2,2~4,4~6,6~8cm的深度播种,每杯50粒种子。所用土壤取自南宁市郊未施用任何农药的土壤,经过80℃烘烤4h以杀死土壤中种子,加水至含水量约为40%.最长培养时间为20d.
2.6不同发芽床培养比较
纸上(TP):在发芽盒内垫上两层充分吸湿的发芽纸,将预处理的种子均匀置床。
2.6.1纸间(BP)
将两层充分吸湿的发芽纸垫在发芽盒内,将预处理的种子均匀置床,另外用一层发芽纸松松地盖在种子上。
2.6.2砂上(TS)
将拌好的湿砂在发芽盒内铺20mm厚,将种子均匀压入砂的表层。
2.6.3砂中(S)
将拌好的湿砂在发芽盒内铺20mm厚,种子均匀置床,然后盖10mm厚的松散湿砂(医学网搜集整理)。
2.7不同预处理条件对发芽的影响
分别以冷冻(-18℃的冰箱保存4d)、冷藏(-4℃的冰箱保存4d)、50%硫酸,50%盐酸,0.05%赤霉素,0.2%硝酸钾,0.2%氯化钠等处理种子,并以不加任何药剂处理的作为对照。试验时,先用滴管吸上述溶液湿润发芽床,然后再把种子点在发芽床上,试验期间水分不足时加水湿润。于第5天统计发芽势,第10天统计萌芽率。
2.8不同贮藏方式对种子寿命的影响
种子用纸袋包装,分别保存在常温干燥通风处、干燥器中、-4℃的冰箱中,每隔3个月做1次发芽试验,周期为1年。
3结果
3.1温度的影响
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