梅花点舌丸胆酸含量测定

梅花点舌丸【1】是由牛黄、珍珠、麝香、雄黄、牛砂、蟾酥等14味药组成的复方制剂。功能清热解毒、消肿止痛。用于疔疮痈肿初起、咽喉牙龈肿痛、口舌生疮。本文用薄层扫描法测定了其中牛黄的胆酸含量，方法简便灵敏，结果准确，加样回收率为99.0%，RSD为1.64%（n=6）。

1仪器与试药

岛津CS-930型薄层扫描仪（日本）；PBQ-I型薄层自动铺板器（重庆南岸新力实验电器厂）；4401CMPBI型微量分析天平（德国）；定量毛细管（美国Drummond公司）；硅胶G（青岛海洋化工厂）；胆酸对照品（中国药品生物制品检定所，批号0078-9312）；梅花点舌丸（市售及自制）；药材（市售）；其它试剂均为分析纯。

2溶液的制备

2.1对照品溶液的制备：称取胆酸对照品约2mg，置2ml量瓶中，用乙醇溶解并稀释至刻度，作为对照品溶液。

2.2供试品溶液的制备：取供试品10丸（0.1g/丸），研碎，混匀，称取约0.6g.精密称定，置具塞锥形瓶中，加入25ml氯仿，浸泡过夜，过滤，锥形瓶及滤纸以氯仿25ml分次洗涤，洗液并入滤液中，回收氯仿，残渣用乙醇溶解并转入5ml量瓶中，用乙醇稀释至刻度，作为供试品溶液。

2.3阴性对照液的制备：按处方取蒙药材（除牛黄）约0.6g，置具塞锥形瓶中，从“加入25ml氯仿，浸泡过夜，……”开始，操作同供试品溶液的制备。

3层析条件及扫描条件

3.1层析条件：硅胶G-0.5%CMC-Na（1：3），厚度为0.5mm，105℃活化1h，置干燥皿中备用；对二种展开系统氯仿-醋酸乙酯-冰醋酸（5：5：1）【2】和醋酸乙酯-正己烷-醋酸-甲醇（32：6：1：1）【2】进行了筛选。结果表明，后一种系统展开效果好（医考必过网搜集整理）。

3.2扫描条件：单波长反射法锯齿形扫描，扫描波长为385nm，外标二点法，SX=3，狭缝为1.2mm×1.2mm.

4线性关系

在同一硅胶G薄层板上点胆酸对照品溶液1.0，2.0，3.0，4.0，5.0ml，展开，晾干，显色，扫描。点样量为横坐标（X），斑点的积分值为纵坐标（Y），用最小二乘法求得回归方程：Y=2745.91+19888.35X，Y=0.9988线性范围为0.92-4.6μg.

5斑点的稳定性试验

在硅胶G板上点胆酸对照品溶液4μl和供试品溶液8μl，按上述条件展开、晾干、显色、扫描，每隔0.5h连续测定斑点的积分值。结果表明，二者在2h内稳定。对照品斑点：=170424.41，RSD=1.90%；供试品斑点：=214651.63，RSD=2.13%.

6精密度试验

用定量毛细管吸取胆酸对照品溶液4μl和供试品溶液8μl，分别点于同一块硅胶G板上，各5个点，按上述条件展开、晾干、显色、扫描，测得积分值。其RSD值，对照品为1.67%，供试品为2.04%.

7加样回收试验

称取已知含量的供试品约0.3g，精密称定，加入胆酸对照品约1.3mg，精密称定。其它操作同“供试品测定”。结果见表1.

8供试品测定

吸取供试品溶液8μl和对照品溶液4、8μl，分别交叉点于同一块硅胶G板上，以醋酸乙酯-正己烷-醋酸-甲醇（32：6：1：1）为展开剂，展开，取出，晾干，以10%硫酸乙醇液显色，110℃加热5-10min至斑点显现，扫描。由仪器内存外标二点法程序定量，微处理机直接打印出浓度值（μg），再计算出供试品中胆酸的含量