中药化学成分预试验大全（2）：氨基酸、多肽、蛋白质

　　氨基酸、多肽、蛋白质

　　（1）加热沉淀试验：加热煮沸 →混浊或沉淀 （蛋白质）+5%H2SO4（不加热）→混浊或沉淀

　　（2）双缩脲反应：+40%NaOH，1%CuSO4 →紫色、红色或紫红色（多肽、蛋白质）

　　（3）茚三酮反应：+0.2%茚三酮试液 →蓝或蓝紫色（氨基酸、多肽、蛋白质）

　　（4）吲哚醌反应：+吲哚醌试液 →各种颜色（氨基酸）

　　（5）Millon反应：+Hg，H2NO2 →红色（蛋白质分子中有酪氨酸组成）

　　（6）Hopkins-Cole反应：+乙醛酸，浓硫酸 →各色（蛋白质分子中有色氨酸组成）

　　（7）氨基酸的薄层层析检查：吸附剂——硅胶G

　　展开剂—— n-BuOH，n-BuOH：HAc：H2O

　　显色剂——0.25%茚三酮试液 →紫红色斑点

　　（1）加热或矿酸试验：取检品的水溶液1ml于试管中，加热至沸或加5％盐酸，如发生混浊或有沉淀示含有水溶性蛋白质。

　　（2）缩二脲试验：取检品的水溶液1ml，加10％氧化钠溶液2滴，充分摇匀，逐渐加入硫酸铜试液，随加摇匀，注意观察，如呈现紫色或紫红色示可能含有蛋白质和氨基酸。

　　凡蛋白质结构中含有两个或两个以上肽键（－CONH－）者均有此反应，能在碱性溶液中与Cu2+[医.学敎育]生成络合物，呈现一系列的颜色反应，二肽呈蓝色，三肽呈紫色，加肽以上呈红色，肽键越多颜色越红。

　　（3）茚三酮试验，取检品的水溶液1ml，加入茚三酮试液2－3滴，加热煮沸4－5分钟，待其冷却，呈现红色棕色或蓝紫色（蛋白质、胨类、肽类及氨基酸）。

　　氨基酸与茚三酮的水合作物作用，氨其酸氧化成醛、氨和二氧化碳，而茚三酮被还原成仲醇，与所后成的氨及另一分子茚三酮缩合生成有蓝紫色的化合物。

　　【注】

　　①茚三酮试剂主要是多肽和氨基酸的显色剂，反应在1小时内稳定。试剂溶液pH值以5－7为宜，必要时可加吡啶数滴或醋酸钠调整。

　　②此反应非常灵敏，但有个别氨基酸不能呈紫色，而呈黄色，如脯氨酸。

　　（4）氨基酸薄层层析检出反应：

　　①吸附剂：硅胶G。

　　②展开剂：（1）正丁醇：水（1：1）（2）正丁醇：醋酸：水（4：1：5）

　　③显色剂：0.5％茚三酮丙酮溶液，喷雾后于1100烘箱放置5分钟，显蓝紫允或紫色。