化学诱变的方法

　　1. 药剂配制

　　硫酸二乙酯（DES）不溶于水，先用少量70%酒精溶解，再加水。

　　有些烷化剂在水中不稳定，会发生"水合作用"，因此配好的药剂不能贮存，应现配现用。一般都是把它们加入到一定酸碱度(pH)的磷酸盐缓冲液（0.01mol/L）中使用。

　　亚硝酸也不稳定，常在临使用前将NaNO2加入到醋酸缓冲液（PH4.5），以生成亚硝酸。

　　2. 试材预处理

　　干种子 预先浸泡，使细胞活泼，增加敏感性，还可提高膜透性。

　　细胞处于DNA合成阶段（S）时，对诱变剂最敏感。诱变处理应在S阶段之前进行。

　　需层积处理的种子，处理前可用层积代替水浸泡。

　　3. 诱变处理

　　（1）浸渍法 种子、枝条、块茎浸入诱变剂溶液，或枝条基部插入溶液。

　　（2）涂抹或滴液法 药剂溶液涂抹或缓慢滴在植株、枝条或块茎的生长点或芽眼上。

　　（3）注入法 用注射器向植物材料中注入溶液，或将材料人工刻伤，用浸过诱变剂的棉团包裹切口。

　　（4）熏蒸法 密封容器内使诱变剂产生蒸汽，对花粉等进行熏蒸。

　　（5）施入法 培养基中加入低浓度诱变剂溶液。

　　4. 诱变后处理

　　处理后的材料，用清水反复冲洗，以降低残留，避免生理损伤。一般冲洗10-30min或更长时间。漂洗后的材料立即播种或嫁接。