胰岛素精制提取品
http://www.ykbg.net/ 来源:原创 2015-01-31 11:50
称取粗制品用pH2.2的7~10倍量的酸水溶解,加30%(按酸水容积)冷丙酮,用5mol/LNH40H调至pH4.2,再补加所用氨水量的
称取粗制品用pH2.2的7~10倍量的酸水溶解,加30%(按酸水容积)冷丙酮,用5mol/LNH40H调至pH4.2,再补加所用氨水量的30%冷丙酮。在5℃以下放置过夜,抽滤,沉淀留用回收胰岛素。取滤液用5mol/LNH4OH调至pH6.2~6.4,加入20氯化锌(ZnC12),如pH变偏酸再调至pH6.0,在冰箱中放置过夜,抽滤,滤液口收胰岛素。滤饼称重,每克干物约用50ml20%枸椽酸溶解。加入固体ZnC120.O8g,加丙酮16m1,搅拌均匀,补加水至100m1,调pH6.0~6.2,放冰箱中48h以上析出结晶,过滤,滤饼收取;滤出母液按上条件,在冰箱中放置2~3d,尚可收口部分结晶。取结晶,用丙酮洗2次,乙醚洗1次,置P205的真空干燥中干燥,即得成品,|育网|收集整理测定生物效价。
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